克倫特羅作為一種β2-腎上腺素受體激動(dòng)劑，在動(dòng)物養(yǎng)殖中曾被非法添加以提高瘦肉率，但其殘留會(huì)對(duì)人體健康造成嚴(yán)重危害。動(dòng)物組織樣品基質(zhì)復(fù)雜，含有大量蛋白質(zhì)、脂肪等干擾物質(zhì)，直接影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。因此，針對(duì)動(dòng)物組織的克倫特羅檢測(cè)試劑盒前處理方法改進(jìn)研究具有重要意義。
傳統(tǒng)前處理方法通常采用酶解步驟和固相萃取小柱凈化，操作步驟繁瑣、耗時(shí)長(zhǎng)、成本高，且易造成目標(biāo)物損失。研究表明，通過優(yōu)化提取條件，在pH值為11.0的條件下，用10 mL乙酸乙酯替代飽和氯化鈉溶液和異丙醇-乙酸乙酯混合溶劑進(jìn)行萃取，可顯著提高提取效率。同時(shí)，用乙腈飽和的正己烷振蕩離心替代陽離子交換小柱凈化，不僅簡(jiǎn)化了操作步驟，還降低了檢測(cè)成本。改進(jìn)后的方法回收率可達(dá)90%以上，適用于不同類別肌肉組織中克倫特羅的檢測(cè)。
對(duì)于酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，研究人員開發(fā)了熱水浴快速提取法，可在幾分鐘至15分鐘內(nèi)完成組織樣品前處理，無需酸堿處理、有機(jī)溶劑及C18柱凈化。該方法操作簡(jiǎn)便、快速高效，特別適合現(xiàn)場(chǎng)快速篩查。檢測(cè)限可達(dá)0.1 ng/mL，定量限為1 ng/mL，回收率為80%-110%，批內(nèi)變異系數(shù)小于10%，批間變異系數(shù)小于20%，具有良好的準(zhǔn)確度和精密度。
在氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法中，樣品在堿化條件下用乙酸乙酯提取，酸性水溶液反萃取，SCX固相萃取小柱凈化，經(jīng)衍生化后進(jìn)行檢測(cè)。該方法回收率為85%-95%，檢出限可達(dá)0.5μg/kg，精密度高、重現(xiàn)性好，適用于動(dòng)物組織中克倫特羅的定量分析。
前處理方法的改進(jìn)不僅提高了檢測(cè)效率，還降低了假陽性和假陰性風(fēng)險(xiǎn)。通過優(yōu)化提取溶劑、簡(jiǎn)化凈化步驟、縮短處理時(shí)間，使克倫特羅檢測(cè)試劑盒在動(dòng)物組織樣品中的應(yīng)用更加便捷、可靠，為食品安全監(jiān)管提供了有力的技術(shù)支撐。
